50
ISSN 2477-9105
Número 28 Vol.1 (2022)
DOI: https://doi.org/10.47187/perf.v1i28.182
¹Universidad Estatal de Bolívar, Guaranda, Ecuador.
²Universidad Técnica Parcular de Loja, Ecuador.
*franklinroman11@gmail.com
Leptospirosis y neosporosis son enfermedades aborvas en el ganado bovino, la primera, una zoonosis
producida por leptospiras, la segunda por un protozoario Neospora caninum enfermedad emergente
en perros. Los objevos fueron determinar la seroprevalencia de los bovinos a Neospora caninum y
leptospira spp. Se ulizaron muestras de suero bovino, la determinación de ancuerpos a Neospora
caninum mediante cELISA y de leptospira spp., por MAT, para la conrmación de ooquistes de
Neospora caninum se realizó el examen coprológico Teleman, en el caso de seroreactores a leptospira
spp., se obtuvo una segunda muestra, se analizaron 956 muestras de 158 UPAs, el 19.35 % resultaron
seroprevalentes a Neospora caninun, a leptospira spp., una seroprevalencia del 74,83% , con tulos
de 1/400 a la primera muestra del 28% y con tulos de 1/800 el 0.2%, la muestra pareada arrojo tulos
de 1/400 en el 28% de las muestras, a las dos enfermedades una seroprevalencia de 19.17%, en los
alrededores de la parroquia San Sebasán, existe mayor probabilidad de idencar leptospiras y en
Jimbilla neosporas.
Palabras claves: Neospora caninum, Leptospira spp., Zoonosis, aborto.
Leptospirosis and neosporosis are aborve diseases in cale, with the former being a zoonosis caused
by leptospira, while the laer is caused by the protozoan Neospora caninum, an emerging disease in
dogs. The purpose of the study was to determine the seroprevalence of cale to Neospora caninum
and Leptospira spp. Bovine serum samples were used, the determinaon of anbodies to Neospora
caninum by cELISA and of leptospira spp., by MAT, for the conrmaon of oocysts of Neospora caninum
the Teleman stool test was performed, in the case of seroposives to leptospira spp., a second sample
was obtained, 956 samples from 158 UPAs were analyzed, 19.35% were seroprevalent to Neospora
caninun, to leptospira spp., a seroprevalence of 74.83%, with ters of 1/400 to the rst sample of
28% and with ters of 1/800 0.2%, the paired sample yielded tles of 1/400 in 28% of the samples, a
seroprevalence of 19.17% for both diseases, in the surroundings of the San Sebasán parish, there is
a greater probability of idenfying leptospires and in Jimbilla neosporas.
Keywords: Neospora caninum, Leptospira spp., Zoonosis, aboron.
SEROPREVALENCIA A LEPTOSPIRA SPP., Y NEOSPORA
CANINUM EN GANADERÍAS DEL CANTÓN LOJA.
RESUMEN
ABSTRACT
Seroprevalence to Leptospira spp., And Neospora caninum in
herds of the Loja canton.
Fecha de recepción: 20-12-2022 Fecha de aceptación: 02-05-2022 Fecha de publicación: 01-08-2022
ISSN 2477-9105
Número 28 Vol.1 (2022)
DOI: https://doi.org/10.47187/perf.v1i28.182
¹Franklin Román-Cárdenas*
¹Andrés Mora
¹Franco Cordero-Salazar
²Pablo Ramón
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SEROPREVALENCIA A LEPTOSPIRA SPP., Y NEOSPORA
CANINUM EN GANADERÍAS DEL CANTÓN LOJA
Román, Cordero, Mora, Ramón
I. INTRODUCCIÓN
La leptospirosis es un trastorno infeccioso de
animales y humanos. Es la infección zoonóca más
común del mundo (1), descrita primariamente
por Adolf Weil en 1886 (2), Smson en 1907
preparo secciones del cerebro, hígado, corazón
y riñón, en los túbulos del riñón visualizo lo que
denomino Espiroqueta interrogans, Después
de 8 años en Japón fue encontrada por los
invesgadores Inada e Ido (3), nombrada como
Espiroqueta icterohemorragica. El riesgo de
infección del huésped luego de la interacción con
fuentes ambientales depende de la capacidad
de leptospira para persisr, sobrevivir e infectar
al nuevo huésped para connuar la cadena de
transmisión. (4), afectando comúnmente a las
poblaciones de escasos recursos y resultando
en una morbilidad y mortalidad signicavas
(5), La leptospirosis a menudo se diagnosca
erróneamente con otras enfermedades febriles
tropicales.(6)
Leptospira interrogans es una de las principales
causas de enfermedades humanas y L.
borgpetersenii es una de las principales causas
de enfermedades animales.(7), El período de
incubación es de 2 a 30 días y la enfermedad
generalmente ocurre de 5 a 14 días después de la
exposición.(8). Las leptospiras colonizan los túbulos
proximales renales e infectan crónicamente el
riñón. Las bacterias vivas se excretan en la orina,
contaminando el medio ambiente (9). La forma
más común de diagnoscar la leptospirosis es a
través de pruebas serológicas, ya sea la prueba
de aglunación microscópica (MAT), que detecta
ancuerpos especícos de serovar, o un ensayo
de fase sólida para la detección de ancuerpos de
inmunoglobulina M (IgM) (10).
Neospora caninum (N. caninum), un protozoario
del lo apicomplexa, se distribuye globalmente
e impone pérdidas económicas signicavas a
los productores y la industria ganadera (11). Los
rumiantes se involucran principalmente como
huéspedes intermediarios y los caninos como
huéspedes denivos (12) La seroprevalencia
informada de exposición a N. caninum en el
ganado oscila entre 7,6 y 41 % en las Américas (13,
14). La patogenicidad de N. caninum varía según
su especie hospedera, el ganado es el huésped
más suscepble, el parásito causa abortos,
mornatos, muertes neonatales, pérdida fetal
temprana y reabsorción de embriones. (15,16).
Este parásito puede persisr en granjas y rebaños
durante años, y la transmisión congénita, la
II. MATERIALES Y MÉTODOS
principal vía de aborto provocada por N. caninum,
juega un papel fundamental en este sendo.
Hoy en día, se dispone de varias técnicas de
diagnósco para la detección de la infección
por N. caninum. En los casos de aborto por
Neospora en bovinos, la histopatología y la
inmunohistoquímica (IHC) ulizando tejidos
de fetos abortados se consideran las pruebas
denivas (17) La reacción en cadena de la
polimerasa (PCR) también se uliza para la
determinación de ácidos nucleicos especícos
de parásitos en muestras de animales abortados,
como cerebros y placenta (18).
Todas las especies de mamíferos son
potencialmente huéspedes accidentales de la
leptospirosis y no se ha idencado ninguna
especie como refractaria a la infección.
Actualmente, existen más de 250 serovariedades
conocidas de Leptospira spp., las cuales muestran
una distribución variable por región geográca
y especie huésped (19). Los parásitos de N.
caninum se han culvado con éxito en líneas
celulares humanas, pero se han informado
tulos bajos de ancuerpos de especicidad no
conrmada contra N. caninum en muestras de
suero humano (20, 21,22). Seis de cada diez casos
humanos de enfermedades infecciosas surgen
de la transmisión animal (23) Los objevos
fueron: (i) determinar la seroprevalencia de los
bovinos a Neospora caninum y leptospira spp.;
(ii) determinar la seroprevalencia de los bovinos
a los microorganismos, en el sector urbano y rural
del cantón Loja.
Ubicación del estudio. El estudio en referencia se
realizó en Unidades de Producción Agropecuarias
UPAs (más de 500m² ) de las parroquias Jimbilla,
Chuquiribamba, Chantaco, Gualel, El Cisne,
Vilcabamba, San Pedro de Vilcabamba, Malacatos,
Quinara, San Sebasán, Sucre, El Sagrario, El Valle,
pertenecientes a la zona urbana y rural del cantón
Loja, que se encuentran entre los 1478 y 2880
msnm., presenta una precipitación por la variación
de las isoyetas de 400 a 900 mm/año, la temperatura
en base al trazo de las isotermas del cantón es de
10°C a 22°C.(23).
Se seleccionaron hembras bovinas comprendidas
en edad reproducva de más de un año de edad,
en las que se han evidenciado o no abortos u otros
problemas relavos a la reproducción, para el estudio
no se consideraron machos de ninguna edad.
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III. RESULTADOS
Se tomaron 956 muestras de sangre de 158
UPAs áreas urbanas y rurales del cantón Loja,
por punción de la arteria coccígea media, se
recolectó en tubos vacutainers de 10 mL., tapa
roja sin ancoagulante previamente rotulados,
se transportaron en cooleres, sin ser expuestos
directamente al hielo, en el laboratorio se
registraron y codicaron en las matrices
internas, el procesamiento se realizó mediante
centrifugación a 3000 rpm., por el lapso de
cinco minutos, el suero sanguíneo obtenido
fue alicuotado en tubos Eppendorf de 0,5 mL.,
se conservaron a -20 ºC., hasta el inicio de las
pruebas, para el examen coproparasitario se
tomaron 40 muestras de caninos de igual candad
de ganaderías que resultaron seroposivas a N.
caninum.
Ejecución de pruebas. La detección de la
presencia de ancuerpos leptospirales se realizó a
través de la prueba de Aglunación Microscópica
en Tubo (MAT) que uliza diluciones seriadas
del suero que se expone a igual volumen de
suspensión de leptospiras vivas, se ulizaron
serovariedades vivas de Leptospira spp.,
veincuatro que se corresponde a patógenas
y una de comportamiento saproco, para la
interpretación de resultados se consideraron
posivas las muestras que alcancen tulos iguales
o superiores a 1 en 100 o más junto con signos
clínicos, posivas si alcanza tulos superiores a
1 en 400 o cuando aumentan la tulación en la
muestra pareada tomada entre los 14 y 21 días
hasta cuatro o más veces sus tulos. Las pruebas
se ejecutaron en los laboratorios del Instuto
Nacional de Invesgación en Salud Pública (INSPI
Quito y Guayaquil). Las biovariedades patógenas
que se ulizaron fueron las clasicadas en L.
interrogans y como control fue ulizada la
biovariedad no patógena L. patoc.
La detección de ancuerpos a Neospora caninum
se realizó mediante el kit de la casa VMRD
Veterinary Medical research and development.
425 NW Albion Drive Pullman, WA 99163, (cELISA)
considerando el protocolo del fabricante .
La detección de ooquistes en muestras de heces de
perros ulizó el método runario para carnívoros
de Teleman, en el cual se procesaron cerca de 5
g de heces por animal, se realizó otación con
solución de sacarosa, las muestras se examinaron
con un microscopio ópco ulizando el objevo
400.
Análisis estadísco. La seroprevalencia y los
intervalos al 95% de conanza se calcularon para
las veinte y cinco biovariedades de Leptospira. Se
ulizó la prueba de Chi-cuadrado para analizar
las asociaciones entre la seroposividad de
Leptospira spp., N. caninum y las parroquias
del cantón Loja, así como también para evaluar
la relación entre los tulos de ancuerpos
especícos y las diferentes serovariedades de
Leptospira. Cuando las condiciones para aplicar
la prueba Chi-cuadrado no fueron adecuadas, el
valor p se aproximó a parr de simulaciones de
Monte Carlo (18) con 10000 permutaciones. Las
pruebas estadíscas se realizaron con el programa
estadísco R versión 4.0.3 (19). Se aplicó regresión
logísca para desarrollar el modelo predicvo de
la seroposvidad de Leptospiras y Neosporas en
función de las parroquias urbanas y rurales del
cantón Loja. Para las parroquias que presentaron
signicación estadísca (p < 0.05) se determinó
la razón de probabilidad (Odds-rao) con el
respecvo intervalo de conanza. Para esto se
ulizó la librería “oddsrao” del programa R.
Seroprevalencia a leptospirosis y neosporosis
bovina en el Cantón Loja.
La prueba de MAT para las 956 muestras mostro
una seroprevalencia a leptospirosis en el 74.83%
de los casos, con tulos iguales o superiores a
1/100, la prueba de cELISA para la detección
de ancuerpos an N. caninum mostro una
seroprevalencia del 19,35% ; la seroprevalencia
para las dos enfermedades es del 19.17%.
Los resultados nos muestran una mayor
seroprevalencia de Leptospira spp., con relación a
Neospora caninum sin embargo, luego de evaluar
la relación entre la seroprevalencia de Leptospira
spp., y Neospora caninum y las diferentes
parroquias del cantón Loja, no se evidenció
relación signicava (X-squared = 20.314, p =
0.9131); es decir la proporción de seroprevalencia
de leptospira y neospora se distribuye de forma
similar en todas las parroquias.
Can-
tón
Muestras Nro. de
muestras
Nro. Muestras
seroreactivas
Anticuerpos
para
Seroprevalencia 95%
IC
Loja
Hembras
bovinas
mayores
de un
año
956 715 Leptospira
spp.
74.83 % 71.4,
78.3
956 185 Neospora
caninum
19.35 % 20.6,
27.4
956 183 Leptospira
spp.,y
Neospora
caninum
19.17 % 16.0,
22.3
Tabla 1. Seroprevalencia a Leptospira spp., y Neospora caninum y a
las dos enfermedades en ganado bovino del cantón Loja.
53
SEROPREVALENCIA A LEPTOSPIRA SPP., Y NEOSPORA
CANINUM EN GANADERÍAS DEL CANTÓN LOJA
Román, Cordero, Mora, Ramón
IV. DISCUSIÓN
Al evaluar el riesgo de presencia de Neosporas
y Leptospiras se encontró que las parroquias
urbanas de San Sebasán y la rural de Jimbilla
fueron signicavamente diferente al resto de
parroquias (Tabla 1).
En la parroquia San Sebasán, la probabilidad
de idencar Leptospiras en las muestras es
6.67 veces más que en el resto de parroquias, en
Jimbilla el riesgo de encontrar Neosporas fue 21
veces mayor al resto de parroquias, y 13 veces
mayor de encontrar simultáneamente Leptospiras
y Neosporas (Tabla 2). El resto de lugares que no
aparecen en la tabla presentaron esmadores de
regresión no signicavos.
Se obtuvieron 509 muestras con tulos de 1/100
(71.1%), 650 muestras con tulos de 1/200
(90.9%), 207 muestras con tulos de 1/400
(28.9%) y una muestra con tulos de 1/800
(0.2%), (Figura 2).
La muestra pareada ulizo del 7.4 % de los
seroreactores, independientemente de la
tulación mostrada (53 muestras) se obtuvieron
tulos de 1/200 en el 54% de los casos (29
muestras); cuatro veces en el 28 % (15 muestras)
y un 18 % no mostraron incremento de los tulos
(9 muestras).
En todas las ganaderías lecheras visitadas se
encontraron entre uno a diez perros al interior de
la propiedad, al realizar la prueba coprológica de
Teleman se determinó la presencia de ooquistes
en el 5% de las muestras.
La leptospirosis ene una amplia distribución,
pero prevalece principalmente en las regiones
tropicales y pobres del mundo (24), en la región
tropical de la provincia de Manabí, los escasos
estudios realizados denotan prevalencias
variables, que van del 35.8% al 75% (25), Fuentes et
al. (26) encontraron que los casos de leptospirosis
en zonas endémicas de enfermedades tropicales
con manifestaciones clínicas similares a la
leptospirosis eran 26 a 49 veces mayores que los
diagnoscados y reportados por los Servicios de
Salud, en estudios realizados en zonas rurales
del ecuador se registró la posividad en orina
de ganado del 35.4 % (n = 17/48), en la misma
invesgación se tomaron muestras de pacientes
febriles sin diarrea o síntomas respiratorios
agudos dando posivos para ADN de leptospira
patógena en el 17,3 % (n = 78/449) (27). En
el estudio se encontró una seroprevalencia
en ganado bovino del 74.83%, no se pudieron
registrar signos clínicos de la enfermedad en los
animales sobre todo en las muestras con tulos
de 1/100 y 1/200 por lo que se puede considerar
que en algún momento estuvieron en contacto
con la bacteria o con la posibilidad de una
enfermedad en curso, en cambio se registró una
seroprevalencia al análisis de la primera muestra
tulos de 1/400 del 28.9% y una muestra con
tulos de 1/800 considerándose una infección
acva. Siguiendo el protocolo se realizó la prueba
a una segunda muestra en la que se determinó
el incremento de los tulos 1/400 en el 28% de
las muestras conrmando la infección acva,
demostrando además que leptospira puede
sobrevivir en un medio ambiente de temperatura
inferior a lo que se reporta habitualmente.
La parroquia con mayor probabilidad de idencar
Leptospiras es San Sebasán, posiblemente al
Figura 1. Seroprevalencia a Leptospira spp y Neospora caninum., en
bovinos de parroquias urbanas y rurales del cantón Loja.
Sitio Estimador OR LI LS valor p
Positivas a MAT
San
Sebastián 1.897 6.67 1.75 24.11 0.0038
Positivas a ELISA
Jimbilla 3.075 21.67 2.4 511.82 0.015
Positivas a MAT y ELISA
Jimbilla 2.565 13 1.43 298.93 0.0411
Tabla 2. Factor de riesgo que afecta la seroprevalencia de Leptospiras
y Neosporas en el cantón Loja, esmado mediante regresión
logísca. OR: odds-rao, LI: límite inferior, LS: límite superior al 95%.
Figura 2. Niveles de tulación encontrados a leptospira spp.
Muestra pareada
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manejo de los animales, ya que estás bacterias se
transportan en la orina de animales infectados,
como roedores, cerdos, vacas, perros y muchas
especies de vida silvestre. Si la orina de un animal
infectado se deposita o drena en un cuerpo de
agua dulce (lago, río, arroyo, etc.) o suelo, la
bacteria puede sobrevivir allí durante semanas o
meses. (28)
En las úlmas dos décadas, N. caninum ha sido
ampliamente invesgada debido a su importancia
como patógeno veterinario. Como resultado de
estos estudios, ahora se sabe que N. caninum ene
una distribución global y causa enfermedades
neuromusculares graves en perros, y aborto y
mortalidad neonatal en el ganado (29). En un
estudio realizado en dos ganaderías de leche en
Ecuador se encontró una alta seroprevalencia
para N. caninum (21,5 %) (30), en nuestro estudio
se encontró una seroprevalencia del 19,35%. Este
patógeno protozoario se manene en el medio
ambiente mediante un ciclo de vida heterogéneo
que involucra un huésped cánido denivo y una
amplia gama de huéspedes intermedios (31), en
todas las ganaderías invesgadas se encontró
perros en su interior que es el principal portador
del parásito. Se cree que ocurren tres métodos
naturales de transmisión de N. caninum en el
ganado: (32) ingesón de ooquistes esporulados
del parásito (transmisión horizontal); (33)
infección transplacentaria (transmisión vercal)
de una madre previamente infectada a su
descendencia (34); o (35) transmisión horizontal
a una madre preñada seguida de transmisión
vercal a su feto (transmisión horizontal y vercal
combinada).
Los tulos de 1:100 o superior frente a uno o
más angenos leptospirales, sólo es evidencia
indicava de la enfermedad en un período
anterior o posible enfermedad en curso.
Por los resultados de las muestras pareadas
se considera conrmada la enfermedad de
leptospirosis bovina cuando aumenta en cuatro o
más veces el tulo de ancuerpos de los reactores
invesgados a los 14 a 21 días posteriores a la
primera prueba en esta invesgación se detecta
una infección acva del 28%.
La presencia de perros en las ganaderías los
convierte a los bovinos en hospedadores
intermediarios y contaminados por transmisión
horizontal
La presencia de roedores cerca a los alimentos y
fuentes de agua conjuntamente con la forma de
crianza de los animales pueden estar incidiendo
en los altos porcentajes de seroposividad a
leptospirosis.
Mayor riesgo para que los bovinos desarrollen
leptospirosis y N.caninum, es la parroquia
Jimbilla y San Sebasán para leptospirosis.
Estos resultados aportan con información para
que las endades competentes tomen medidas
prevenvas y se logre romper la cadena de
infección.
V. CONCLUSIONES
VI. AGRADECIMIENTOS
VII. REFERENCIAS
A los ganaderos del cantón Loja, que a pesar de
las condiciones connúan con su trabajo todos
los días.
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