R
esumen
A
bstract
32
ESTUDIO MACROMORFOLÓGICO Y MICROMORFOLÓGICO
DE PLANTAS DEL GÉNERO PASSIFLORA DE LA PROVINCIA DE
CHIMBORAZO (ECUADOR)
Sánchez Luis
1
, Vinueza Diego
1
, Erazo Norma
2
, Acosta Karen
1
, Contero Fausto
1
,
Pilco Gisela
1
, Tierra Patricia
2
, Noboa Patricio
2
, Falconí Félix
3
, Abdo Susana
1
.
1
Facultad de Ciencias, Escuela Superior Politécnica de Chimborazo,
2
Facultad de Recursos Naturales, Escuela Superior Politécnica de Chimborazo,
Panamericana Sur km 1 ½, Riobamba-Ecuador.
3
Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad Nacional de Chimborazo,
km. 1 1/2 vía Guano, Avenida Antonio José de Sucre, Riobamba-Ecuador.
karen.acosta.leon@gmail.com
El género Passiflora es característico en el continente americano y presenta varios usos, entre ellos,
Passiflora edulis, comúnmente conocida como maracuyá, se emplea como sedante. En este estudio, se
realizó una evaluación farmacognósica de cinco pasifloras de la provincia de Chimborazo: P. ligularis,
P. tripartita, P. quadrangularis, P. mixta y P. manicata. Se recolectaron las cinco especies en zonas de
tres pisos climáticos donde se desarrollan. Se procedió al estudio farmacognósico comparativo de las
cinco especies mediante el alisis macromorfológico de hojas, flores, frutos y semillas, por observación
directa; y alisis micromorfológico, realizando cortes laminares de flores y hojas, con su respectiva
tinción con el colorante Fast Green, para observar sus componentes histológicos. El estudio del polen, se
realizó previa acetólisis y observación microscópica de los gnulos. Las especies de estudio presentaron
diversidad de características botánicas, existiendo entre ellas diferencias tanto macromorfológicas como
micromorfológicas; sin embargo, P. mixta y P. tripartita presentan estructuras muy cercanas. Los estudios
macromorfológicos, micromorfológicos, conjuntamente con el estudio del polen permitieron identificar
cada una de las especies de Passiflora y determinar sus características botánicas.
Palabras clave: Passiflora, macromorfológico, micromorfológico, polen.
The genus Passiflora is characteristic of America and has several uses, including Passiflora edulis, com-
monly known as maracu, used as a sedative. In this study, a pharmacognostic evaluation was carried
out in five species from the province of Chimborazo (Ecuador): P. ligularis, P. tripartita, P. quadran-
gularis, P.mixta and P. manicata. The five species of Passiflora were collected in three climatic areas
where they thrive. We proceeded to the comparative pharmacognostical study of the species through
macromorphological analysis by direct observation of leaves, flowers, fruits and seeds; and the micro-
morphological analysis was done through laminar sections of flowers and leaves and staining with Fast
Green to observe their histological components. The study of pollen was done prior to acetolysis and
microscopic observation of the granules. The species studied have a variety of botanical characteristics,
among them there are morphological and micromorphological differences. However, P. mixta and P.
tripartita are very close in their structures. The macromorphological study of leaves, flowers, fruit and
seeds, the micromorphological study of flowers and leaves, together with the study of pollen, allows
identifying each of the species of Passiflora and determining their botanical characteristics.
Keywords: Passiflora, macromorphological, micromorphological, pollen.
ISSN 1390-5740 Número 17 Vol. 1 (2017)
ISSN 2477-9105
Fecha de recepción: 05/04/2017
Fecha de aceptación: 24/04/2017
33
Sánchez, Otros
INTRODUCCIÓN
La ansiedad puede describirse como la
vivencia de un sentimiento de amena-
za, expectación de carácter tenso ante
el futuro inmediato y de alteración del
equilibrio psicosomático ante acciones
que no representan un peligro real o, por
lo menos, desproporcionado en relación
con el estímulo desencadenante (1).
En el tratamiento de la ansiedad se em-
plean habitualmente dos tipos de fárma-
cos: los ansiolíticos y los antidepresivos.
Los ansiolíticos más utilizados son las
benzodiacepinas y los antidepresivos
más comunes son los inhibidores selecti-
vos de recaptación de serotonina (ISRS).
Estos grupos de fármacos generan un
sinnúmero de efectos no deseados como
son: somnolencia, alteraciones de la me-
moria, alteraciones de la atención y de la
concentración, dependencia (adicción) y
tolerancia (pérdida progresiva de efec-
tividad). Estas reacciones adversas pro-
vocan que la ansiedad sea una patología
psicosomática difícil de tratar (2).
Los trastornos de ansiedad afectan al
3,8% de la población mundial de edad
mayor y los problemas por abuso de sus-
tancias psicotrópicas, casi al 1%. En la
población infanto-juvenil, el porcentaje
se encuentra entre el 9 al 21%. En el caso
del Ecuador, 10% de la población sufre
de estrés (3-5).
Especies del género Passiflora han sido
usadas en la medicina tradicional como
remedio para enfermedades neurogéni-
cas en diversos países (6). Cabe destacar
el caso de Passiflora ligularis, común-
mente conocida en Ecuador como gra-
nadilla, cuyas raíces, hojas y flores son
usadas en forma de infusión para tratar
problemas de los nervios (7). Passiflora
incarnata es un remedio tradicional en
Europa para el insomnio, ansiedad, y ha
sido usado como un té sedativo en Amé-
rica del Norte. Passiflora quadrangularis, conocida popu-
larmente como badea en Ecuador (7), es usada a lo largo
de Caribe como sedativa (8).
Existen diversos estudios acerca de la actividad neurofar-
macológica de especies de Passiflora, especialmente de P.
incarnata y P. edulis. (9-11). Se ha demostrado que Passi-
flora incarnata presenta actividad ansiolítica y sedativa.
Los principales constituyentes químicos de Passiflora in-
carnata son los flavonoides (0,25%) como vitexina, iso-
vitexina, orientina, isoorientina, apigenina, kaempferol y
quercetina. Además, se encuentran alcaloides indólicos
(0,1 %) como harmano, harmina, harmalina, harmol y
harmalol (12-14).
Passiflora edulis (maracuyá) ha mostrado actividad ansio-
lítica a bajas dosis, siendo los flavonoides sus componen-
tes activos (6). P. edulis es rica en glucósidos, incluyendo
flavonoides del tipo glicosídico, luteolina-6-C-chinovo-
sida, luteolina-6-C-fucosida (15), dos de los flavonoides
más comunes derivados de luteolina, cuya principal fun-
ción es inhibir el daño oxidativo al ADN celular (8).
En el control de calidad farmacognósico de las drogas
vegetales existen diferentes ensayos: organolépticos, bo-
nicos, fisicoquímicos, farmacodinámicos y biológicos.
En los ensayos bonicos se controlan características
macroscópicas y microscópicas, con el fin de identificar
correctamente a las especies vegetales y poder detectar
falsificaciones. (16)
En este estudio se realizó el análisis macroscópico y mi-
croscópico de cinco especies de Passiflora presentes en
la provincia de Chimborazo: P. ligularis (granadilla), P.
tripartita (taxo), P. quadrangularis (badea), P. mixta (ta-
xo-sacha) y P. manicata (auca taxo), las cuales son origi-
narias del callejón interandino, destacando que P. mixta
se encuentra de manera exclusiva en los Andes ecuatoria-
nos (17).
Este trabajo permitió garantizar las características botáni-
cas de calidad de las especies vegetales de estudio, lo cual
resulta fundamental para las posteriores investigaciones de
composición química y actividad farmacológica.
MATERIAL Y MÉTODOS
Las muestras fueron recolectadas en diferentes zonas de
la provincia de Chimborazo (Ecuador): P. ligularis y P.
tripartita en Riobamba (2754 m.s.n.m.), P. mixta en la
34
Candelaria (2683 m.s.n.m.), P. manicata en Pallatanga
(2377 m.s.n.m.) y P. quadrangularis en Cumandá (400
m.s.n.m.). El material vegetal recolectado, fue lavado, se-
cado a una temperatura de 21
o
C y prensado por 5 días
para su posterior reconocimiento morfológico.
Para el estudio micromorfológico, se realizaron cortes la-
minares de pétalos, flores y hojas. Se aplicó FAA (90 ml
de alcohol 70%, 5 ml de ácido acético y 5 ml de formol
al 4%) como fijador, por 24 horas. Las muestras fueron
tratadas con etanol en concentraciones crecientes desde
70% por espacios de 12 horas y finalmente se realizó la in-
clusión de las muestras en parafina líquida por 12 horas,
para proceder a realizar cortes de 5 µm de grosor con la
ayuda de un micrótomo y, finalmente, los cortes fueron
situados en baño de agua y en una placa portaobjetos. Se
procedió a la coloración de las placas con safranina, Fast
Green y se observaron en microscopio óptico con lente
de 40X.
Para el estudio del polen, se empleó el método de acetóli-
sis descrito por Erdtman (18) de manera que las anteras se
suspendieron en glicerina gelatina, se transfirieron a una
placa portaobjetos y se observaron en microscopio óptico
con lente de 40X.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Estudio Macromorfológico
La descripción macromorfológica de las cinco especies
de Passiflora se detalla en la *Tabla 1, la cual muestra
las principales características estructurales de las dife-
rentes especies. La raíz y el tallo no presentan diferencias
morfológicas apreciables entre especies, presentando
una raíz axonomorfa y un tallo herbáceo-trepador, pro-
pio de la familia. Estas plantas se consideran trepadoras
mediante zarcillos, los cuales son órganos para poder
trepar, ascender o enroscarse, algunos autores los con-
sideran como hojas modificadas (17). Las hojas con un
mayor tamaño corresponden a P. quadrangularis, segui-
da de P. ligularis.
Las hojas de P. ligularis, P. mixta y P. manicata, presen-
tan color verde más oscuro, debido a que, al habitar en
zonas más altas, están expuestas a mayor radiación ul-
travioleta y generan mayor cantidad de clorofila (19).
En cuanto a la forma de las hojas, tres de las especies son
trifoliadas, mientras que P. ligularis y P. quadrangularis,
son acorazonadas y elípticas, respectivamente. Con ex-
cepción de P. ligularis, que tiene la base
de la lámina cordada y borde entero y
liso, el resto de especies poseen una base
redondeada y borde aserrulado.
Las flores de todas las especies son sim-
ples, hermafroditas y actinomorfas. To-
das las especies estudiadas poseen un
liz de 5 sépalos dialisépalos de color
verde. El androceo de P. mixta posee
4 elementos (estambres), el resto de es-
pecies poseen un androceo con 5 ele-
mentos. El gineceo de todas las especies
analizadas posee 3 elementos (hojas car-
pelares).
El fruto es una baya, presenta semillas
dispersas con el endocarpo. El mesocar-
po de cuatro especies de Passiflora es es-
ponjoso mientras que el de P. tripartita
posee un mesocarpo membranoso. El
tamaño y color del fruto de cada especie
varía de 5 a 30 cm de largo y de 4 a 16 cm
de diámetro, siendo la especie con fruto
más grande P. quadrangularis, seguida
de P. tripartita, P. ligularis, P. manicata
y P. mixta. Los frutos de P. ligularis y P.
tripartita son de color amarillo, P. mix-
ta presenta frutos de color anaranjado, P.
manicata, de color verdoso y en P. qua-
drangularis presenta coloración amari-
llo verdosa. Las semillas son monocro-
máticas, de color café, sus dimensiones
varían entre 4.7 mm a 9.1 mm de largo,
3.6 mm a 6.3 mm de ancho y 2 mm a 2.7
mm de grosor, siendo la de mayor tama-
ño la semilla de P. quadrangularis.
La *Tabla 2 muestra las características
estructurales determinadas mediante la
observación microscópica de las placas
con los cortes histológicos de las especies
del género Passiflora de Chimborazo.
En los cortes histológicos de los pétalos,
se observan cloroplastos y cromoplas-
tos con un diámetro entre 4.5 a 5.5 µm,
siendo mayor la presencia de cromoplas-
tos en P. manicata y cloroplastos en las
otras especies.
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35
El tejido conductor presenta haces vas-
culares, de mayor tamaño en P. ligula-
ris, P. mixta y P. quadrangularis, y en el
caso de P. tripartita es ligeramente más
ancho. En el caso de P. ligularis, P. mani-
cata y P. quadrangularis están presentes
esclereidas solitarias, mientras que en las
otras especies están formando grupos.
P. quadrangularis presenta cristales de
oxalato de calcio (20). El parénquima de
P. ligularis tiene células longitudinales y
las otras especies células isodiamétricas.
En el análisis histológico de las hojas, se
observa epidermis uniseriada. P. mani-
cata posee una epidermis más delgada,
mientras que P. ligularis, P. mixta y P.
manicata contienen una cantidad con-
siderable de cutícula protectora (10). P.
tripartita presenta tricomas simples, en
P. mixta son multicelulares y en P. ma-
nicata son alargados bicelulares. En el
análisis del tejido conductor de las hojas
de P. ligularis se observa el xilema cen-
tral rodeado de floema (perifloemático),
con un haz vascular que mide aproxima-
damente 60 µm de diámetro. P. mixta
presenta canales conductores más grue-
sos con un haz vascular de aproximada-
mente 65 µm de diámetro y un xilema
anular, este tipo de xilema se obser
también en P. quadrangularis. Se pudo
notar la presencia de estomas en la ma-
yoría de las especies con un ancho apro-
ximado de 28 a 30 µm. El parénquima
de las hojas es un parénquima modifi-
cado (hidatodos), P. ligularis presenta
un parénquima lignificado más fuerte,
resistente y estico con la presencia de
cristales. P. mixta presenta un parénqui-
ma superior empalizado de aproximada-
mente 34 µm de ancho (20), P. manica-
ta presenta un parénquima con células
isodiamétricas celusicas esponjosas,
en P. quadrangularis es en empalizada
y con una disposición longitudinal con
abundantes cristales. En P. tripartita, se
observa en el esclerénquima, conductos
lignificados con material celulósico a su
alrededor, P. ligularis y P. manicata pre-
sentan paredes fuertemente lignificadas y presencia de
esclereidas, P. manicata y P. mixta esclerénquima unido
parcialmente a los haces vasculares por lo que se encuen-
tran mayormente protegidos y P. quadrangularis escle-
nquima perifloemático (xilema rodeado de floema),
con esclereidas de aproximadamente 18 µm de diámetro.
El polen de las especies Passifloras (Tabla 2) presenta for-
ma esférica con una exina o cubierta exterior reticulada y
una intina o cubierta interior fina, se observó la presencia
de colpos monoporados en P. ligularis y P. quadrangu-
laris, mientras que el resto de la especies son biporadas.
La diferencia más notoria en el polen es su diámetro que
aproximadamente en P. tripartita es de 57 µm, en P. ligu-
laris 56 µm, en P. mixta 60 µm, en P. manicata 60 µm y
en P. quadrangularis 50 µm.
Sánchez, Otros
36
*Tabla 1. Análisis Macromorfológico de Especies del Género Passiflora de Chimborazo
Passiora
ligularis
Imagen 1
Passiora
mixta
Imagen 2
Passiora
manicata
Imagen 3
Passiora
tripartita
Imagen 4
Passiora
quadrangularis
Imagen 5
RAÍZ AXONOMORFA
TALLO HERBÁCEO, VOLUBLE O TREPADOR, CON ZARCILLOS FOLIARES
HOJAS SIMPLES ALTERNAS O ESPARCIDAS, HERBÁCEAS, BRILLANTES Y LABRAS
Medidas
-Largo: 15.2 cm
-Ancho: 19.3 cm
-Largo: 13.5 cm
-Ancho: 18.7 cm
-Largo: 7.5 cm
-Ancho: 9.3 cm
-Largo: 11.5 cm
-Ancho: 15.2 cm
-Largo: 15.8 cm
-Ancho: 19.5 cm
Color
Discolora
-Haz: Verde opaco
-Envés: Verde oscuro
Discolora
-Haz: Verde oscuro
-Envés: Verde claro
Discolora
-Haz: Verde amarillo
-Envés: Verde oscuro
Discolora
-Haz: Verde oscuro
-Envés: Verde claro
Discolora
-Haz: Verde claro
-Envés: Verde oscuro
Peciolo
Grande: 8 cm Pequeño 1.5 cm Pequeño 2 cm Pequeño 1.8 cm Grande 5.3 cm
Venación
Plurinervada,
pinnatinervada
Plurinervada,
palmatinervada
Plurinervada,
palmatinervada
Plurinervada,
palmatinervada
Plurinervada,
pinnatinervada
Forma
Cordada, acorazonada Trifoliadas Trifoliadas Trifoliadas Elíptica u ovoides
Base
Cordada Redondeada Redondeada Redondeada Redondeada
Ápice
Agudo Agudo Obtuso Acuminado Acuminado
Borde
Entero o liso Aserrulado Aserrulado Aserrulado Aserrado
FLORES SIMPLES, HERMAFRODITAS, ACTINOMORFAS
Paracáliz
3 elementos separados 3 elementos unidos 3 elementos separados
Cáliz
5 sépalos separados, dialisépalo
Color cáliz
Verde
Corola
Multipétala
5 pétalos separados,
dialipétalo
5 pétalos separados,
dialipétalo
5 pétalos separados,
dialipétalo
Multipétala
Color corola
Morados con blanco Rosada Rojo Rosada Morado claro
Androceo
5 elementos 4 elementos 5 elementos
Gineceo
3 elementos 3 hojas carpelares
Supero 3 hojas
carpelares, gincárpico
Supero 3 hojas
carpelares
Supero 3 hojas
carpelares
FRUTO: BAYA CON EXOCARPO LISO GLABRO, ENDOCARPO SUCULENTO Y SEMILLAS DISPERSAS
Color
Amarillo Anaranjado Verdoso Amarillo Amarillo verdoso
Tamaño
-Largo: 8 cm
-Diámetro: 6 cm
-Largo: 5 cm
-Diámetro: 4 cm
-Largo: 8 cm
-Diámetro: 5 cm
-Largo: 12 cm
-Diámetro: 5 cm
-Largo: 30 cm
-Diámetro: 16 cm
Mesocarpo
Esponjoso Esponjoso Esponjoso Membranoso Esponjoso
SEMILLAS CON FORMA ELÍPTICA
Medidas
-Ancho: 4.5 mm
-Grosor: 2.7mm
-Largo: 6.1mm
-Ancho: 5.7mm
-Grosor: 2.6mm
-Largo:6.6mm
-Ancho: 3.9mm
-Grosor: 2.5mm
-Largo: 5.1mm
-Ancho: 3.6mm
-Grosor: 2.1mm
-Largo: 4.7mm
-Ancho: 6.3mm
-Grosor: 2.0mm
-Largo: 9.1mm
Margen
Entero Entero Entero Entero Estriado
Ápice
Cuerno único Cuerno único Cuerno único Cuerno único Cuerno central
Base
Redonda Obtusa Redonda-truncada Redonda-truncada Cordulado
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Sánchez, Otros
P. tripartita
(Breit. Hort.)
P. ligularis
(Juss)
P. mixta
(L.f.)
P. manicata
(Juss. Pers)
P. quadrangularis
(Feuillet)
ANÁLISIS HISTOLÓGICO DE PÉTALOS
Cloroplastos
Imagen 6
Ovalados,
Amarillo intenso
Imagen 7
Circulares,
Amarillo intenso
Imagen 8
Ovalados,
Amarillo intenso
Imagen 9
N.O* Se observan
cromoplastos rojos
Imagen 10
Escasos, Ovalados,
Azul intenso
Tejido
mecánico
Imagen 11
Esclereida con 118.72
µm de diámetro
Imagen 12
Esclereida solitaria
20µm de diámetro
Imagen 13
Esclereidas de tamaño
variable
Imagen 14
Esclereida solitaria
Imagen 15
Esclereida con 13µm
de diámetro, con
cristales (drusas)
Parénquima
Imagen 16
Células isodiamétricas
Imagen 17
Células longitudinales
Imagen 18
Células isodiamétricas
Imagen 19
Células isodiamétricas
Imagen 20
Células isodiamétricas
ANÁLISIS HISTOLÓGICO DE HOJAS
Epidermis
(Adaxial,
abaxial)
Imagen 21
Conexión epidermis
superior e inferior
mediante canales que
conectan estomas
Imagen 22
Epidermis uniseriada
con cutículaprotectora
Imagen 23
Epidermis uniseriada
con cutícula protectora
Imagen 24
Epidermis delgada con
cutícula protectora
Imagen 25
Epidermis uniseriada
con menor cantidad de
cutícula
Tejido
conductor
(Nervadura
central, haces
vasculares)
Imagen 26
Haces vasculares
(xilema)
Imagen 27
Xilema central rodeada
de oema
Perioemático
Imagen 28
Canales conductores
gruesos con 65µm
de diámetro y xilema
anular
Imagen 29
Haces vasculares con
xilema
Imagen 30
Presencia de un xilema
anular
38
*Tabla 2. Análisis micromorfológico de especies del género Passiflora de Chimborazo
N.O* No Observable
N.O** La observación de cloroplastos pudo verse afectada por el tratamiento químico aplicado al material vegetal.
FUENTE: Laboratorio de la Escuela de Agronomía (ESPOCH)
Parénquima
Imagen 31
Parénquima
modicado
Imagen 32
Parénquima lignica-
do, con cristales
Imagen 33
Parénquima superior
empalizado
Imagen 34
Células isodiamétricas
Imagen 35
Empalizado con
abundantes cristales
Esclerénqui-
ma (Lignina,
celulosa)
Imagen 36
Lignicado
Imagen 37
Lignicado
Imagen 38
Acompañado de haces
vasculares
Imagen 39
Lignicado
Imagen 40
Perioemático
POLEN
Forma
Esférica
Tamaño
Diámetro de 57µm Diámetro de 56 µm Diámetro de 60µm Diámetro de 62 µm Diámetro de 50µm
Poros
Biporada Monoporada Biporada Biporada Monoporada
Colpos
Estrechos Estrechos Estrechos Anchos Estrechos
Observaciones
Imagen 41
Imagen 42
Imagen 43
Imagen 44
Imagen 45
Imagen 46
Imagen 47
Imagen 48
Imagen 49
Imagen 50
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R
eferencias
39
CONCLUSIONES
El estudio macromorfológico de
hojas, flores, frutos y semillas, y el
estudio micromorfológico de flores,
hojas y polen permitieron identificar
y diferenciar cada una de las especies
del género Passiflora presentes en la
provincia de Chimborazo.
Esta investigación representa la etapa
inicial del estudio comparativo de
la actividad psicoactiva de especies
de Passiflora de Chimborazo, las
cuales presentan un alto potencial ansiolítico. En
etapas posteriores es necesario realizar análisis de
la composicn química y estudios de actividad
farmacológica y toxicidad.
AGRADECIMIENTOS
Se agradece a la Escuela Superior Politécnica del
Chimborazo por el financiamiento y la facilidad de uso
de las instalaciones, ya que el presente artículo responde
al trabajo llevado a cabo dentro del marco de Proyecto
de Investigación SIV.29 “Estudio comparativo de la
actividad psicoactiva de pasifloras de la provincia de
Chimborazo” del periodo 2014-2017.
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ISSN 1390-5740 Número 17 Vol. 1 (2017)
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