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ISSN 2477-9105
Número 28 Vol.1 (2022)
DOI: https://doi.org/10.47187/perf.v1i28.182
¹Universidad Estatal de Bolívar, Guaranda, Ecuador.
²Universidad Técnica Parcular de Loja, Ecuador.
*franklinroman11@gmail.com
Leptospirosis y neosporosis son enfermedades aborvas en el ganado bovino, la primera, una zoonosis
producida por leptospiras, la segunda por un protozoario Neospora caninum enfermedad emergente
en perros. Los objevos fueron determinar la seroprevalencia de los bovinos a Neospora caninum y
leptospira spp. Se ulizaron muestras de suero bovino, la determinación de ancuerpos a Neospora
caninum mediante cELISA y de leptospira spp., por MAT, para la conrmación de ooquistes de
Neospora caninum se realizó el examen coprológico Teleman, en el caso de seroreactores a leptospira
spp., se obtuvo una segunda muestra, se analizaron 956 muestras de 158 UPAs, el 19.35 % resultaron
seroprevalentes a Neospora caninun, a leptospira spp., una seroprevalencia del 74,83% , con tulos
de 1/400 a la primera muestra del 28% y con tulos de 1/800 el 0.2%, la muestra pareada arrojo tulos
de 1/400 en el 28% de las muestras, a las dos enfermedades una seroprevalencia de 19.17%, en los
alrededores de la parroquia San Sebasán, existe mayor probabilidad de idencar leptospiras y en
Jimbilla neosporas.
Palabras claves: Neospora caninum, Leptospira spp., Zoonosis, aborto.
Leptospirosis and neosporosis are aborve diseases in cale, with the former being a zoonosis caused
by leptospira, while the laer is caused by the protozoan Neospora caninum, an emerging disease in
dogs. The purpose of the study was to determine the seroprevalence of cale to Neospora caninum
and Leptospira spp. Bovine serum samples were used, the determinaon of anbodies to Neospora
caninum by cELISA and of leptospira spp., by MAT, for the conrmaon of oocysts of Neospora caninum
the Teleman stool test was performed, in the case of seroposives to leptospira spp., a second sample
was obtained, 956 samples from 158 UPAs were analyzed, 19.35% were seroprevalent to Neospora
caninun, to leptospira spp., a seroprevalence of 74.83%, with ters of 1/400 to the rst sample of
28% and with ters of 1/800 0.2%, the paired sample yielded tles of 1/400 in 28% of the samples, a
seroprevalence of 19.17% for both diseases, in the surroundings of the San Sebasán parish, there is
a greater probability of idenfying leptospires and in Jimbilla neosporas.
Keywords: Neospora caninum, Leptospira spp., Zoonosis, aboron.
SEROPREVALENCIA A LEPTOSPIRA SPP., Y NEOSPORA
CANINUM EN GANADERÍAS DEL CANTÓN LOJA.
RESUMEN
ABSTRACT
Seroprevalence to Leptospira spp., And Neospora caninum in
herds of the Loja canton.
Fecha de recepción: 20-12-2022 Fecha de aceptación: 02-05-2022 Fecha de publicación: 01-08-2022
ISSN 2477-9105
Número 28 Vol.1 (2022)
DOI: https://doi.org/10.47187/perf.v1i28.182
¹Franklin Román-Cárdenas*
¹Andrés Mora
¹Franco Cordero-Salazar
²Pablo Ramón
iD
iD
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51
SEROPREVALENCIA A LEPTOSPIRA SPP., Y NEOSPORA
CANINUM EN GANADERÍAS DEL CANTÓN LOJA
Román, Cordero, Mora, Ramón
I. INTRODUCCIÓN
La leptospirosis es un trastorno infeccioso de
animales y humanos. Es la infección zoonóca más
común del mundo (1), descrita primariamente
por Adolf Weil en 1886 (2), Smson en 1907
preparo secciones del cerebro, hígado, corazón
y riñón, en los túbulos del riñón visualizo lo que
denomino Espiroqueta interrogans, Después
de 8 años en Japón fue encontrada por los
invesgadores Inada e Ido (3), nombrada como
Espiroqueta icterohemorragica. El riesgo de
infección del huésped luego de la interacción con
fuentes ambientales depende de la capacidad
de leptospira para persisr, sobrevivir e infectar
al nuevo huésped para connuar la cadena de
transmisión. (4), afectando comúnmente a las
poblaciones de escasos recursos y resultando
en una morbilidad y mortalidad signicavas
(5), La leptospirosis a menudo se diagnosca
erróneamente con otras enfermedades febriles
tropicales.(6)
Leptospira interrogans es una de las principales
causas de enfermedades humanas y L.
borgpetersenii es una de las principales causas
de enfermedades animales.(7), El período de
incubación es de 2 a 30 días y la enfermedad
generalmente ocurre de 5 a 14 días después de la
exposición.(8). Las leptospiras colonizan los túbulos
proximales renales e infectan crónicamente el
riñón. Las bacterias vivas se excretan en la orina,
contaminando el medio ambiente (9). La forma
más común de diagnoscar la leptospirosis es a
través de pruebas serológicas, ya sea la prueba
de aglunación microscópica (MAT), que detecta
ancuerpos especícos de serovar, o un ensayo
de fase sólida para la detección de ancuerpos de
inmunoglobulina M (IgM) (10).
Neospora caninum (N. caninum), un protozoario
del lo apicomplexa, se distribuye globalmente
e impone pérdidas económicas signicavas a
los productores y la industria ganadera (11). Los
rumiantes se involucran principalmente como
huéspedes intermediarios y los caninos como
huéspedes denivos (12) La seroprevalencia
informada de exposición a N. caninum en el
ganado oscila entre 7,6 y 41 % en las Américas (13,
14). La patogenicidad de N. caninum varía según
su especie hospedera, el ganado es el huésped
más suscepble, el parásito causa abortos,
mornatos, muertes neonatales, pérdida fetal
temprana y reabsorción de embriones. (15,16).
Este parásito puede persisr en granjas y rebaños
durante años, y la transmisión congénita, la
II. MATERIALES Y MÉTODOS
principal vía de aborto provocada por N. caninum,
juega un papel fundamental en este sendo.
Hoy en día, se dispone de varias técnicas de
diagnósco para la detección de la infección
por N. caninum. En los casos de aborto por
Neospora en bovinos, la histopatología y la
inmunohistoquímica (IHC) ulizando tejidos
de fetos abortados se consideran las pruebas
denivas (17) La reacción en cadena de la
polimerasa (PCR) también se uliza para la
determinación de ácidos nucleicos especícos
de parásitos en muestras de animales abortados,
como cerebros y placenta (18).
Todas las especies de mamíferos son
potencialmente huéspedes accidentales de la
leptospirosis y no se ha idencado ninguna
especie como refractaria a la infección.
Actualmente, existen más de 250 serovariedades
conocidas de Leptospira spp., las cuales muestran
una distribución variable por región geográca
y especie huésped (19). Los parásitos de N.
caninum se han culvado con éxito en líneas
celulares humanas, pero se han informado
tulos bajos de ancuerpos de especicidad no
conrmada contra N. caninum en muestras de
suero humano (20, 21,22). Seis de cada diez casos
humanos de enfermedades infecciosas surgen
de la transmisión animal (23) Los objevos
fueron: (i) determinar la seroprevalencia de los
bovinos a Neospora caninum y leptospira spp.;
(ii) determinar la seroprevalencia de los bovinos
a los microorganismos, en el sector urbano y rural
del cantón Loja.
Ubicación del estudio. El estudio en referencia se
realizó en Unidades de Producción Agropecuarias
UPAs (más de 500m² ) de las parroquias Jimbilla,
Chuquiribamba, Chantaco, Gualel, El Cisne,
Vilcabamba, San Pedro de Vilcabamba, Malacatos,
Quinara, San Sebasán, Sucre, El Sagrario, El Valle,
pertenecientes a la zona urbana y rural del cantón
Loja, que se encuentran entre los 1478 y 2880
msnm., presenta una precipitación por la variación
de las isoyetas de 400 a 900 mm/año, la temperatura
en base al trazo de las isotermas del cantón es de
10°C a 22°C.(23).
Se seleccionaron hembras bovinas comprendidas
en edad reproducva de más de un año de edad,
en las que se han evidenciado o no abortos u otros
problemas relavos a la reproducción, para el estudio
no se consideraron machos de ninguna edad.
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Número 28 Vol.1 (2022)
DOI: https://doi.org/10.47187/perf.v1i28.182
III. RESULTADOS
Se tomaron 956 muestras de sangre de 158
UPAs áreas urbanas y rurales del cantón Loja,
por punción de la arteria coccígea media, se
recolectó en tubos vacutainers de 10 mL., tapa
roja sin ancoagulante previamente rotulados,
se transportaron en cooleres, sin ser expuestos
directamente al hielo, en el laboratorio se
registraron y codicaron en las matrices
internas, el procesamiento se realizó mediante
centrifugación a 3000 rpm., por el lapso de
cinco minutos, el suero sanguíneo obtenido
fue alicuotado en tubos Eppendorf de 0,5 mL.,
se conservaron a -20 ºC., hasta el inicio de las
pruebas, para el examen coproparasitario se
tomaron 40 muestras de caninos de igual candad
de ganaderías que resultaron seroposivas a N.
caninum.
Ejecución de pruebas. La detección de la
presencia de ancuerpos leptospirales se realizó a
través de la prueba de Aglunación Microscópica
en Tubo (MAT) que uliza diluciones seriadas
del suero que se expone a igual volumen de
suspensión de leptospiras vivas, se ulizaron
serovariedades vivas de Leptospira spp.,
veincuatro que se corresponde a patógenas
y una de comportamiento saproco, para la
interpretación de resultados se consideraron
posivas las muestras que alcancen tulos iguales
o superiores a 1 en 100 o más junto con signos
clínicos, posivas si alcanza tulos superiores a
1 en 400 o cuando aumentan la tulación en la
muestra pareada tomada entre los 14 y 21 días
hasta cuatro o más veces sus tulos. Las pruebas
se ejecutaron en los laboratorios del Instuto
Nacional de Invesgación en Salud Pública (INSPI
Quito y Guayaquil). Las biovariedades patógenas
que se ulizaron fueron las clasicadas en L.
interrogans y como control fue ulizada la
biovariedad no patógena L. patoc.
La detección de ancuerpos a Neospora caninum
se realizó mediante el kit de la casa VMRD
Veterinary Medical research and development.
425 NW Albion Drive Pullman, WA 99163, (cELISA)
considerando el protocolo del fabricante .
La detección de ooquistes en muestras de heces de
perros ulizó el método runario para carnívoros
de Teleman, en el cual se procesaron cerca de 5
g de heces por animal, se realizó otación con
solución de sacarosa, las muestras se examinaron
con un microscopio ópco ulizando el objevo
400.
Análisis estadísco. La seroprevalencia y los
intervalos al 95% de conanza se calcularon para
las veinte y cinco biovariedades de Leptospira. Se
ulizó la prueba de Chi-cuadrado para analizar
las asociaciones entre la seroposividad de
Leptospira spp., N. caninum y las parroquias
del cantón Loja, así como también para evaluar
la relación entre los tulos de ancuerpos
especícos y las diferentes serovariedades de
Leptospira. Cuando las condiciones para aplicar
la prueba Chi-cuadrado no fueron adecuadas, el
valor p se aproximó a parr de simulaciones de
Monte Carlo (18) con 10000 permutaciones. Las
pruebas estadíscas se realizaron con el programa
estadísco R versión 4.0.3 (19). Se aplicó regresión
logísca para desarrollar el modelo predicvo de
la seroposvidad de Leptospiras y Neosporas en
función de las parroquias urbanas y rurales del
cantón Loja. Para las parroquias que presentaron
signicación estadísca (p < 0.05) se determinó
la razón de probabilidad (Odds-rao) con el
respecvo intervalo de conanza. Para esto se
ulizó la librería “oddsrao” del programa R.
Seroprevalencia a leptospirosis y neosporosis
bovina en el Cantón Loja.
La prueba de MAT para las 956 muestras mostro
una seroprevalencia a leptospirosis en el 74.83%
de los casos, con tulos iguales o superiores a
1/100, la prueba de cELISA para la detección
de ancuerpos an N. caninum mostro una
seroprevalencia del 19,35% ; la seroprevalencia
para las dos enfermedades es del 19.17%.
Los resultados nos muestran una mayor
seroprevalencia de Leptospira spp., con relación a
Neospora caninum sin embargo, luego de evaluar
la relación entre la seroprevalencia de Leptospira
spp., y Neospora caninum y las diferentes
parroquias del cantón Loja, no se evidenció
relación signicava (X-squared = 20.314, p =
0.9131); es decir la proporción de seroprevalencia
de leptospira y neospora se distribuye de forma
similar en todas las parroquias.
Can-
tón
Muestras Nro. de
muestras
Nro. Muestras
seroreactivas
Anticuerpos
para
Seroprevalencia 95%
IC
Loja
Hembras
bovinas
mayores
de un
año
956 715 Leptospira
spp.
74.83 % 71.4,
78.3
956 185 Neospora
caninum
19.35 % 20.6,
27.4
956 183 Leptospira
spp.,y
Neospora
caninum
19.17 % 16.0,
22.3
Tabla 1. Seroprevalencia a Leptospira spp., y Neospora caninum y a
las dos enfermedades en ganado bovino del cantón Loja.
53
SEROPREVALENCIA A LEPTOSPIRA SPP., Y NEOSPORA
CANINUM EN GANADERÍAS DEL CANTÓN LOJA
Román, Cordero, Mora, Ramón
IV. DISCUSIÓN
Al evaluar el riesgo de presencia de Neosporas
y Leptospiras se encontró que las parroquias
urbanas de San Sebasán y la rural de Jimbilla
fueron signicavamente diferente al resto de
parroquias (Tabla 1).
En la parroquia San Sebasán, la probabilidad
de idencar Leptospiras en las muestras es
6.67 veces más que en el resto de parroquias, en
Jimbilla el riesgo de encontrar Neosporas fue 21
veces mayor al resto de parroquias, y 13 veces
mayor de encontrar simultáneamente Leptospiras
y Neosporas (Tabla 2). El resto de lugares que no
aparecen en la tabla presentaron esmadores de
regresión no signicavos.
Se obtuvieron 509 muestras con tulos de 1/100
(71.1%), 650 muestras con tulos de 1/200
(90.9%), 207 muestras con tulos de 1/400
(28.9%) y una muestra con tulos de 1/800
(0.2%), (Figura 2).
La muestra pareada ulizo del 7.4 % de los
seroreactores, independientemente de la
tulación mostrada (53 muestras) se obtuvieron
tulos de 1/200 en el 54% de los casos (29
muestras); cuatro veces en el 28 % (15 muestras)
y un 18 % no mostraron incremento de los tulos
(9 muestras).
En todas las ganaderías lecheras visitadas se
encontraron entre uno a diez perros al interior de
la propiedad, al realizar la prueba coprológica de
Teleman se determinó la presencia de ooquistes
en el 5% de las muestras.
La leptospirosis ene una amplia distribución,
pero prevalece principalmente en las regiones
tropicales y pobres del mundo (24), en la región
tropical de la provincia de Manabí, los escasos
estudios realizados denotan prevalencias
variables, que van del 35.8% al 75% (25), Fuentes et
al. (26) encontraron que los casos de leptospirosis
en zonas endémicas de enfermedades tropicales
con manifestaciones clínicas similares a la
leptospirosis eran 26 a 49 veces mayores que los
diagnoscados y reportados por los Servicios de
Salud, en estudios realizados en zonas rurales
del ecuador se registró la posividad en orina
de ganado del 35.4 % (n = 17/48), en la misma
invesgación se tomaron muestras de pacientes
febriles sin diarrea o síntomas respiratorios
agudos dando posivos para ADN de leptospira
patógena en el 17,3 % (n = 78/449) (27). En
el estudio se encontró una seroprevalencia
en ganado bovino del 74.83%, no se pudieron
registrar signos clínicos de la enfermedad en los
animales sobre todo en las muestras con tulos
de 1/100 y 1/200 por lo que se puede considerar
que en algún momento estuvieron en contacto
con la bacteria o con la posibilidad de una
enfermedad en curso, en cambio se registró una
seroprevalencia al análisis de la primera muestra
tulos de 1/400 del 28.9% y una muestra con
tulos de 1/800 considerándose una infección
acva. Siguiendo el protocolo se realizó la prueba
a una segunda muestra en la que se determinó
el incremento de los tulos 1/400 en el 28% de
las muestras conrmando la infección acva,
demostrando además que leptospira puede
sobrevivir en un medio ambiente de temperatura
inferior a lo que se reporta habitualmente.
La parroquia con mayor probabilidad de idencar
Leptospiras es San Sebasán, posiblemente al
Figura 1. Seroprevalencia a Leptospira spp y Neospora caninum., en
bovinos de parroquias urbanas y rurales del cantón Loja.
Sitio Estimador OR LI LS valor p
Positivas a MAT
San
Sebastián 1.897 6.67 1.75 24.11 0.0038
Positivas a ELISA
Jimbilla 3.075 21.67 2.4 511.82 0.015
Positivas a MAT y ELISA
Jimbilla 2.565 13 1.43 298.93 0.0411
Tabla 2. Factor de riesgo que afecta la seroprevalencia de Leptospiras
y Neosporas en el cantón Loja, esmado mediante regresión
logísca. OR: odds-rao, LI: límite inferior, LS: límite superior al 95%.
Figura 2. Niveles de tulación encontrados a leptospira spp.
Muestra pareada